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鸡甲状腺素(T4)ELISA试剂盒操作规程,新手的福音
发布时间:2018-11-14   点击次数:37次
      鸡甲状腺素(T4)ELISA试剂盒操作规程
  标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)•●、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
  温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
  配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
  鸡甲状腺素(T4)ELISA试剂盒注意事项:
  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  底物请避光保存。
  严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
  所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
  本试剂不同批号组分不得混用。
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