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ELISA试剂盒试验成果的解析方法
发布时间:2019-04-24   点击次数:32次
   对于ELISA试剂盒试验室科研工作者来说,试验细节使非常重要的。在ELISA试剂盒试验中的各项操作细节有许多,如尽量少用排枪•●、勤换枪头,加样时由低浓度向高浓度加,因为这样能够削减跳孔的几率。而整个试验的最后关键就是成果的处理办法了,那么在今天就为您带来的是ELISA试剂盒成果解析方式。

  1•●、ELISA试验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度规范品的均匀OD值,复孔的变异系数应该小于20%。
  2•●、均匀OD值减去空白孔的OD值。
  3•●、制造规范曲线。
  以减去本底后的OD值为X轴,规范品的浓度为Y轴,利用作图软件得出一个适宜的计算办法。主张运用适宜的软件来作图,比方CurveExpert 1.4。这款软件能够给出许多种办法(比方直线•●、半对数•●、对数•●、四参数方程等)并从中挑选一条zui适宜的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据符合,能够将规范品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,计算出规范品的浓度,得到的成果应该与实际浓度很接近(+/-10%)。挑选拟合度zui高的那条曲线。
 
  假如出现规范曲线的线性欠好,或平行性欠好(双孔对照孔的OD值差别很大),或出现跳孔的现象,可能引起的原因有酶标板孔间相互污染•●、洗板后未能赶快进行下一步操作•●、增加样品或其它试剂时操作的办法不对•●、孵育方位避光性不佳或盖板膜没有密封好使得水分蒸发•●、酶标板孔问参加的试剂量不同,相对应的解决办法是加样时请当心勿将液体溅人另一孔中,人工洗板时也请当心,勿将洗涤液溅人另一微孔中•●、在洗板后及时进行下一步操作•●、增加试剂时请悬空滴入,切记勿将枪头接触到板孔内,汲取不同试剂瓶中的液体时就要更换一次枪头•●、承认孵育环境不透光,盖板膜将酶标板密封好•●、运用已校正过的微量加样器,如将*次参加液体时枪头上留有一滴的液体滴下,那么将以后枪头上留有的液体也滴下,以确保参加液体体积的一致性。
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